**细胞检测技术的进步——基于微流控技术的*四代循环**细胞分选技术

随着对**转移的深入研究，循环**细胞（Circulating Tumor Cell，CTC）已成为当前**学研究的热点。在外周血中检测循环**细胞是预示**早期转移较直接的方法，在**早期转移的临床诊断中具有积极的意义。检测循环**细胞可用来揭示**转移行为、反映**的侵袭性，具有指导临床个体化**并对患者进行预后评估重大价值。
自1869年循环**细胞被**提出，经历150年仍无法被广泛应用于临床，因为在1mL血液中，大约有5,000,000,000个血细胞，而CTC的含量往往只有1-50个。因此寻求稳定、灵敏以及特异性高的检测方法是解决 CTC检测问题的关键。从技术发展来看，CTC分离富集技术分为四代：**代为基于物理特性的粗分离技术，*二代为基于生化特性的*磁珠技术，*三代为基于物理特性的膜分离技术，*四代为微流控技术。
**代分离技术，基于物理特性的粗分离技术通过特殊滤膜装置、密度梯度离心将CTC分离出来。这些技术操作简单成本低廉，不依赖细胞表面抗原的表达，捕获的细胞数量多，但是由于CTC物理特性的异质性，难以富集到高纯度的CTC。
*二代分离技术，基于生化特性的*磁珠技术。有阳性选择法和阴性选择法。阳性选择分离法即利用特异性的抗体“捕获”**细胞。这种技术是将抗**细胞表面标志物的抗体包被在磁性小珠上，这样不但可以利用抗原抗体结合来识别循环**细胞 (CTC)，还可以用磁性“捕获”患者血样中的循环**细胞 (CTC)，随后通过磁场即可将磁珠捕获与未捕获的细胞分离。但是循环中的**细胞常是高度异质性的，这时具有组织特异性的表面标志物的表达就会有所下调。这样的结果就会导致一些变异的**细胞可以逃脱掉捕获富集的过程，就会得到假阴性结果，从而导致错误的诊断。阴性选择法是消减血中所有不需要的细胞，比如红细胞和白细胞。这样就能够仅留下少量的含有循环**细胞 (CTC)的富集样本。阴性富集法需要采用大量抗体，成本高，稳定性差，难以保持CTC细胞活性，富集率及纯度都较难保证。
*三代为基于物理特性的膜分离技术。根据循环**细胞直径的大小，选用一定孔径的膜进行分离。漏检小粒径**细胞尤其是**干细胞，而为了提高捕获效率，则会残留大量的背景细胞，对鉴定造成较大的难度。
*四代为微流控技术。根据**细胞的病理学定义—核质比显著**正常细胞，采用基于细胞刚性程度、尺寸等物理特性的微流控芯片法，可实现非抗体依赖的CTC活性细胞无损捕获，较大限度捕获上皮来源、间质来源以及干细胞来源所有表型循环**细胞。
国初科技（厦门）有限公司大力推广*四代微流控循环**细胞分选技术，该技术采用光刻技术、高分子材料合成技术、等离子键合技术、微流体技术、仿生技术、精准控制技术等六大工艺技术打造，具有操作简单、富集率高、纯度高等优点。*四代微流控循环**细胞分选仪可实现CTC高效、无标记、无损分离。分选样品量只需5ml全血，**细胞收率＞95%，红细胞去除率接近**，白细胞去除率＞99.9%，分离时间仅需20分钟，全程自动化操作，*专业人员。
 
*四代微流控循环**细胞分选仪富集无标记、完整活性细胞，可用于**细胞形态学分析、细胞代谢分析、**药物开发、原代**细胞库建立等用途，还可用于单细胞蛋白组学分析、细胞表型分析、细胞*靶点分析等等。